第10章 疯狂学习(第2/3 页)

来表达外源基因。例如，在小鼠基因组的安全位点插入一段表达蛋白质所需要的完整DNA序列单元，包含特定启动子、需要过表达基因的CDS区以及polyA结构来实现过表达某种蛋白质。定点敲入一般能保证插入基因的正常表达，且对小鼠无副作用。

原位敲入：在原基因敲除的位点插入新的基因。利用小鼠自身的启动子，在原基因敲除的位点插入新的基因CDS区，一般为引入报告基因以观察启动子表达情况，如GFP。也用于点突变鼠的构建。

此外，基因敲入技术原理基于CRISPR-Cas9基因敲入系统。在Cas9内切酶切割双链DNA，且有一段高度同源的DNA修复模板存在的情况下，生物体内启动HDR修复路径，将一段外源DNA定点插入基因内部。

其三：基因转录是以DNA为模板合成RNA的过程，是基因表达的第一步。转录过程由RNA聚合酶催化，基因的上游具有结合RNA聚合酶的区域，叫作启动子。启动子是一段具有特定序列的DNA，具有和RNA聚合酶特异性结合的位点，决定了基因转录的起始位点。RNA聚合酶与启动子结合后，在特定区域将DNA双螺旋两条链之间的氢键断开，使DNA解旋，形成单链区，以非编码链为模板合成RNA互补链的过程就开始了。

最后就是：基因调控可以通过多种方式实现，包括但不限于以下几种：

转录因子调控：转录因子可以识别特定的DNA序列并与之结合，从而控制基因的表达。它们通常与RNA聚合酶或其他转录调控因子相互作用，共同决定哪些基因应该被转录以及转录的速率。

表观遗传修饰：表观遗传修饰包括DNA甲基化、组蛋白修饰等，它们可以通过改变染色质的结构和功能来控制基因的表达。

RNA沉默：RNA沉默是一种通过产生小干扰RNA（siRNA）来降解特定mRNA的方法，从而控制基因的表达。

生物钟调控：生物钟调控是一种通过调节生物体内的时间来控制基因表达的方式。生物钟可以感知环境信号，如光、温度等，并调节基因的表达，使生物体的生理活动适应环境的变化。

营养物质调节：营养物质调节是通过改变细胞内营养物质的水平来控制基因的表达。例如，营养物质的缺乏可以诱导一些基因的表达，以帮助细胞适应低营养环境。

信号转导通路：信号转导通路是一种通过传递外部信号来调节基因表达

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